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Coelenterazine 腔腸素系列的工作原理
   Coelenterazine 腔腸素系列是天然熒光素中zui普遍的,它可作為很多熒光素酶的底物。作為海洋動(dòng)物體內(nèi)貯存光能的分子,它廣泛存在于海洋生物體內(nèi),例如海腎,海蜇,水螅等。天然腔腸素作為海腎熒光素酶(Renilla Luciferase, 簡(jiǎn)稱Rluc)的底物發(fā)射~460 nm的光。天然腔腸素的分子式是:C26H21N3O3, 分子質(zhì)量:423.48

  Coelenterazine 腔腸素系列的工作原理:

  以Coelenterazine 腔腸素系列為底物的熒光素酶在有分子氧的條件下,氧化腔腸素,產(chǎn)生高能量的中間產(chǎn)物, 并在此過(guò)程中發(fā)射藍(lán)色光。與甲蟲(chóng)熒光素/熒光素酶系統(tǒng)不同,腔腸素/熒光素酶系統(tǒng)不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更便于體內(nèi)生物熒光的研究。目前研究得zui透徹的以腔腸素為底物的熒光素酶來(lái)源于海腎(Renilla), 即海腎熒光素酶 (Renilla Luciferase,簡(jiǎn)稱Rluc)。

  Coelenterazine 腔腸素系列也是另一族以水母發(fā)光蛋白為代表的海洋發(fā)光蛋白的輔助因子。在一個(gè)以熒光素/熒光素酶系統(tǒng)為基礎(chǔ)略作改變的系統(tǒng)中,水母發(fā)光蛋白穩(wěn)定的地結(jié)合了處于反應(yīng)狀態(tài)的腔腸素,氧化反應(yīng)在水母發(fā)光蛋白與鈣離子結(jié)合后開(kāi)始進(jìn)行。這種對(duì)鈣離子的反應(yīng)是不依賴于氧氣的,水母發(fā)光蛋白所發(fā)射的藍(lán)色光的量和酶濃度及Ca++ 濃度成正比。這種特性使得腔腸素可作為熒光素酶,氧氣及鈣離子的檢測(cè)試劑。

  水母發(fā)光蛋白/Coelenterazine 腔腸素系列系統(tǒng)與熒光鈣離子指示劑相比,在檢測(cè)鈣離子方面具有以下優(yōu)點(diǎn): 可檢測(cè)較大范圍的鈣濃度 – 從0.1uM 至 >100uM;樣品無(wú)自體熒光,背景熒光低于使用熒光鈣離子指示劑;雖然信號(hào)比使用熒光鈣離子指示劑弱,但是通過(guò)成像儀器可以得到更高的信噪比,因此具有更高的靈敏度。由于水母發(fā)光蛋白復(fù)合體不會(huì)被運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞外,所以可進(jìn)行數(shù)小時(shí)至數(shù)天的鈣離子的觀測(cè)。

  Coelenterazine 腔腸素系列的疏水性使它易通過(guò)細(xì)胞膜,適于全細(xì)胞研究。

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