Trypsin 1:250, Powder (Porcine)

豬源胰蛋白酶1:250（粉末）

產(chǎn)品標簽

Trypsin 1:250 胰酶；Collagenase NB 4 膠原酶NB4（標準級別）；Trypsin-EDTA (0.25%)；Dispase II 中性蛋白酶；Roche；CAS：9001-12-1；

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，來源于胰腺的一種絲氨酸蛋白酶，由223個氨基酸殘基組成的單鏈多肽，底物特異性是帶正電荷的賴氨酸和精氨酸側(cè)鏈。胰酶主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端，當兩者之一緊隨為脯氨酸的情況除外。另外，當切割位點任一邊緊鄰酸性殘基，胰酶水解速率也會減緩。

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以無活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通過切割其末端六肽而得到活化，產(chǎn)生天然單鏈形式的β-胰酶（β-Trypsin），隨后進行有限的自發(fā)裂解產(chǎn)生具水解活性的α-Trypsin（由二硫鍵共價連接的二條肽鏈組成）。胰酶水解活性可被多種化合物所抑制，有1）來源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制劑；2）銀離子；3）有機磷化合物，如氟磷酸異丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制劑，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品是來源于豬胰腺的胰蛋白酶凍干粉，經(jīng)γ射線處理滅活病毒，經(jīng)過豬細小病毒和支原體檢測?；跇藴蕼y定方法的酶活力為250 units/mg，即1:250。廣泛用于細胞傳代，對貼壁細胞進行消化以制備單細胞懸液，常用的工作濃度是0.025-0.5%（w/v）。也可聯(lián)合其他蛋白酶如膠原酶、彈性蛋白酶一起使用，以消化組織。

產(chǎn)品特性

1. EC NO：3.4.21.4
2. CAS NO：9002-07-7
3. 同義名：Trypsin, from Porcine Pancreas; Trypsin Powder, Porcine 1:250; Tryptase; Tryptar; Cocoonase; Parenzyme; Parenzymol;
4. 分子量：23.4 kDa
5. 螯合劑：無EDTA
6. 酚紅指示劑：無酚紅
7. 外觀：白色至類白色粉末
8. 溶解性：溶于水，幾乎不溶于乙醇和甘油
9. zuijia工作溫度：37°C
10. zuijia工作pH：7.0-9.0
11. 酶活性：根據(jù)美國藥典專論規(guī)定的胰蛋白酶活性測定條件（25°C 10 min， pH 7.6），1 g 胰蛋白酶能消化 250 g 酪蛋白底物。

使用方法

1. 胰酶儲存液（2.5%，w/v）的配制

1.1 稱取2.5g胰酶粉末溶于100ml 不含鈣鎂的平衡鹽緩沖液，如HBSS（Hank′s Balanced Salt Solution），并調(diào)整pH在7.4-7.6，此時得到的即2.5%胰酶儲存液，置于4℃短時間保存，3個月相對穩(wěn)定。建議分裝凍存，利于長期保存。解凍后可能會出現(xiàn)少量沉淀，屬于正?，F(xiàn)象，不會影響使用效力。

1.2 細胞的消化可以直接用胰酶溶液，但常使用胰酶-EDTA溶液，因為EDTA是一種II價金屬離子螯合劑，

【①】：胰酶用于細胞傳代的工作濃度范圍為0.025%-0.5%，具體濃度的選擇主要受胰酶活性、孵育時間和細胞系類型幾個方面影響。若用過高濃度消化過長時間，會破壞細胞膜結(jié)構(gòu)，進而殺死細胞。當對使用濃度把握不大，建議先使用低濃度消化，慢慢的摸索出合適的工作濃度。

【注②】：胰酶-EDTA溶液的配制（僅作參考，根據(jù)需要的實際胰酶濃度來調(diào)整）

2. 貼壁細胞消化（培養(yǎng)板）【詳見maokangbio】

注意事項

1）胰蛋白凍干粉產(chǎn)品常遇到的活性定義及其轉(zhuǎn)換，

1 BAEE Unit：在25℃，pH 7.6 的條件下，以BAEE為底物，3.2 ml的反應(yīng)體系中，A₂₅₃吸光值每分鐘會發(fā)生0.001的變化即為一個酶活單位。

1 TAME Unit： 在25℃，pH 8.2，0.001M Ca²⁺條件下，每分鐘水解 1μmol p-toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester（TAME）的用量。

1 USP Unit：在條件下，每分鐘引起吸光值發(fā)生0.003的變化的樣品活性。

1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit

2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】 

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Trypsin 1:250 豬源胰蛋白酶1:250 細胞分離與流式分析

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